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    研域課堂:原代細胞的培育辦法

    發(fā)布時間: 2019-10-11  點擊次數(shù): 1961次

    1、安排塊培育法 


    (1)依照前述辦法取材,將安排剪成或切成1mm3巨細的小塊,并參加少許培育基使安排濕潤。 


    (2)將小塊均勻涂布于瓶壁,每小塊距離0.2 cm~0.5cm,一般在25mL培育瓶(底面積為17.5cm2)可接種20~30小塊為宜,小塊放置后,輕輕翻轉(zhuǎn)培育瓶,使瓶底朝上,然后于瓶內(nèi)參加適量培育基蓋好瓶塞,將瓶歪斜放置在37℃溫箱內(nèi)。 


    (3)培育2~4小時,待小塊貼附后,將培育瓶緩慢翻轉(zhuǎn)平放,靜置培育,動作要輕,嚴禁搖擺和來回振動,以防因為激動而使小塊漂起而造成培育失敗,若安排塊不易貼壁可預先在瓶壁涂一薄層血清、胎汁或鼠尾膠原等。


    2.消化培育法 


    該辦法是選用前述的消化渙散法,將阻礙細胞成長的細胞間質(zhì)(包含基質(zhì)、纖維等)去除,使細胞渙散形成細胞懸液,然后分瓶培育。 


    3.懸浮細胞培育法


    關于懸浮成長的細胞,如白血病細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和**細胞無需消化,可選用低速離心分離,直接培育,或經(jīng)細胞分層液分離后接種培育。 

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